构建预血管化细胞膜片及血管形成相关因子的表(5)
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【摘要】综上所述,预血管化细胞膜片血管形成相关因子表达出现显著变化,这些分子可能参与了新生血管形成,这些发现可能有助于理解其机制,影响机制需要进
综上所述,预血管化细胞膜片血管形成相关因子表达出现显著变化,这些分子可能参与了新生血管形成,这些发现可能有助于理解其机制,影响机制需要进一步深入研究。
图 1 |兔骨髓间充质干细胞形态(×100)Figure 1 |Morphology of rabbit bone marrow mesenchymal stem cells (×100)图注:A 为原代细胞,贴壁生长,培养3 d 时散在分布,呈梭形或不规则形状;B-D分别为第1,2,3 代细胞,贴壁生长,细胞多呈纺锤形,呈平行排列或旋涡状生长
图 2 |兔骨髓间充质干细胞表面标志物鉴定Figure 2 |Immunophenotype identification of rabbit bone marrow mesenchymal stem cells
图 3 |兔骨髓间充质干细胞多向分化能力鉴定(×100)Figure 3 |Identification of multipotent differentiation of rabbit bone marrow mesenchymal stem cells (×100)图注:A 为经成骨诱导分化培养基处理,茜素红染色可见细胞具有钙盐沉积;B 为未诱导组,茜素红染色为阴性;C 为经成脂诱导分化培养基处理,油红O 染色可见细胞内出现脂滴;D 为未诱导组,油红O 染色为阴性
图 4 |干细胞膜片形态学观察(×100)Figure 4 |Morphology of stem cell sheets (×100)图注:A 为经抗坏血酸处理3 d 的骨髓间充质干细胞,细胞密度不断增加,细胞间隙不明,细胞呈梭状,重叠生长;B 为未经抗坏血酸处理3 d 的骨髓间充质干细胞,细胞密度增加幅度小,细胞间密切接触,细胞体积增大;C 为经抗坏血酸处理14 d 的骨髓间充质干细胞,细胞间隙消失、重叠生长,形态难以辨认;D 为未经抗坏血酸处理14 d的骨髓间充质干细胞,细胞单层生长,密切接触,细胞变大、变圆;E 为经抗坏血酸处理14 d 后用无菌镊收集细胞膜片,形成膜片样结构;F 为未经抗坏血酸处理未形成膜片样结构
图 5 |干细胞膜片多向分化能力鉴定(×100)Figure 5 |Identification of multipotent differentiation of stem cell sheets (×100)图注:A 为经成骨培养基诱导分化的干细胞膜片,茜素红染色可见细胞具有钙盐沉积;B 为未诱导分化的干细胞膜片,茜素红染色阴性;C 为经成脂培养基诱导分化的干细胞膜片,油红O 染色可见细胞内脂滴染成红色;D为未诱导分化的干细胞膜片,油红O 染色阴性
图6 |干细胞膜片细胞外基质相关检测Figure 6 |Detection of extracellular matrix of stem cell sheet图注:A 为干细胞膜片苏木精-伊红染色,细胞质及细胞外基质染成粉红色,细胞核染成蓝色,细胞复层生长,可见大量细胞外基质(×200);B 为干细胞膜片与骨髓间充质干细胞细胞外基质Ⅰ型胶原及纤维连接蛋白mRNA 表达,aP< 0.05
图7 |兔脐静脉内皮细胞形态学(×100)Figure 7 |Morphological of rabbit umbilical vein endothelial cells (×100)图注:A-C 分别为兔脐静脉内皮细胞P0、P1、P2 代,细胞贴壁生长,为多角形,单层,当细胞汇合、融合时排列呈“铺路石”样
图8 |预血管化细胞膜片与脐静脉内皮细胞形态学观察(×100)Figure 8 |Morphology of prevascularized cell sheet group and rabbitumbilical vein endothelial cells group (×100)图注:A1-A3 为预血管化细胞膜片干预3,7,14 d,3 d 时预血管化细胞膜片中的脐静脉内皮细胞发生迁移、重排,7 d 可见细胞排列成条索状结构(箭头示),14 d 时形成网状结构;B1-B3 为脐静脉内皮细胞单独培养3,7,14 d,随着培养时间的延长,脐静脉内皮细胞单独培养组细胞密度不断增加,形成细胞团,未形成网状结构
图9 |预血管化细胞膜片与脐静脉内皮细胞苏木精-伊红染色(×200)Figure 9 |Hematoxylin-eosin staining of prevascularized cell sheet group and rabbit umbilical vein endothelial cells group (×200)图注:A1-A3 为预血管化细胞膜片干预3,7,14 d,3 d 时可见细胞排列不均匀,7 d 时可见细胞条索状排列(箭头示),14 d 见细胞呈网状结构;B1-B3 为脐静脉内皮细胞单独培养3,7,14 d,随着培养时间延长,细胞密度不断增加,形成细胞团,未见条索状、网状结构形成
图10 |预血管化细胞膜片与脐静脉内皮细胞CD31 免疫组化(×200)Figure 10 | CD31 immunohistochemistry of prevascularized cell sheet and umbilical vein endothelial cells (×200)图注:A 为预血管化细胞膜片,可见形成血管网状结构;B 为单独培养的脐静脉内皮细胞,未见形成条索状、网状结构
图11 |预血管化细胞膜片与脐静脉内皮细胞血管形成相关基因mRNA表达Figure 11 |mRNA expression of angiogenesis-related genes of prevascularized cell sheet and umbilical vein endothelial cells图注:A-D 分别为血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、血管生成素1 与血管生成素2 mRNA 表达; PVCS 为预血管化细胞膜片,RUVECs 为兔脐静脉内皮细胞。aP< 0.05
文章来源:《材料保护》 网址: http://www.clbhzzs.cn/qikandaodu/2021/0305/502.html
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